Home >> Souches de Neisseria meningitidis isolées des infections invasives en France -: Phénotypes et profils de sensibilité aux antibiotiques

Souches de Neisseria meningitidis isolées des infections invasives en France -: Phénotypes et profils de sensibilité aux antibiotiques

Les infections dues à Neisseria meningitidis constituent un problème majeur de santé publique En France, un total de souches cliniques de N meningitidis provenant d’infections invasives a été étudié au Centre National de Référence des Méningocoques Paris. Les souches de sérogroupe B étaient les plus fréquentes, suivies par les sérogroupes. C souches% et souches du sérogroupe W% Divers phénotypes observés, reflétant l’hétérogénéité de la population méningococcique. Les souches étaient sensibles aux antibiotiques actuellement utilisés pour le traitement et la chimioprophylaxie des infections méningococciques. Cependant, la prévalence des méningocoques à sensibilité réduite à la pénicilline augmente. et représentaient ~% des isolats au cours de cette période, ce qui justifie une surveillance continue de ce phénomène

Neisseria meningitidis est l’une des principales causes de méningite bactérienne et de septicémie dans le monde. Les souches isolées de ces infections invasives sont principalement des sérogroupes capsulaires A, B, C, Y et W, qui comprennent divers sérotypes et sérosubtypes définis en termes d’antigénicité. les principales protéines membranaires externes PorB et PorA, respectivement Malgré la disponibilité d’antibiotiques efficaces, le taux de létalité demeure élevé ~% en France, en particulier chez les nourrissons et les personnes âgées La plupart des souches de N meningitidis sont sensibles à de nombreux antibiotiques disponibles, notamment β-lactamines, rifampicine, chloramphénicol, tétracycline, quinolones et macrolides Les β-lactamines sont les antibiotiques de choix pour le traitement, tandis que la rifampicine, la spiramycine et la ciprofloxacine sont recommandées pour la chimioprophylaxie des infections à méningocoques. Des isolats de méningocoques présentant une sensibilité réduite à la pénicilline PenI ont été détectés en anglais d , Espagne , et Afrique du Sud En France, les isolats PénI de méningocoque ont été rapportés pour la première fois chez des méningocoques présentant une résistance élevée à la pénicilline MIC, ⩾ μg / mL en raison de la production de β-lactamases rares. Comme les antibiotiques β-lactamines sont les médicaments de choix pour le traitement des maladies méningococciques, la fréquence croissante des souches méningococciques à sensibilité réduite à la pénicilline est alarmante et nécessite une surveillance attentive. rapport, nous étudions la prévalence et les caractéristiques épidémiologiques des isolats de méningocoques invasifs résistants aux antibiotiques, en nous concentrant en particulier sur les isolats présentant une sensibilité réduite à la pénicilline G en France pendant:

Matériaux et méthodes

Souches bactériennes et sérotypage De janvier à décembre, le Centre national français de référence pour le méningocoque de Paris a étudié un total d’isolats cliniques de méningites à N contre les infections invasives sérogroupe sérotypique: les déterminations sérotubes sériques ont été réalisées par des méthodes standard Détermination des antibiotiques Etest Nous avons évalué la sensibilité des souches méningococciques aux antibiotiques au moyen du test de diffusion disque-agar. Les disques Bio-Rad ont été chargés de pénicilline G μg, d’oxacilline μg, d’ampicilline μg, d’amoxicilline μg, d’amoxicilline et de clavulanique. acide / μg, céfotaxime μg, ceftriaxone μg, spectinomycine μg, tétracycline UI, pefloxacine μg, sulfonamides μg, rifampicine μg, chloramphénicol μg, érythromycine IU ou spiramycine μg Les CMI de la pénicilline G, de l’amoxicilline et du céfotaxime ont été déterminées par Etest AB Biodisk Des suspensions méningococciques ont été préparées dans M phosphate-buf Bio-Rad La densité bactérienne a été ajustée à l’unité de MacFarland, et mL de la suspension a été déposé à la surface des plaques carrées de milieu gélococci-méningocoque gélose Les diamètres des zones d’inhibition autour des disques et les points où la croissance des bactéries a intersecté la bande Etest ont été déterminés après h d’incubation à ° C sous% CO La CMI a été définie comme la plus faible concentration de l’antibiotique inhibant la croissance visible après h d’incubation à ° C sous% CO Les valeurs de seuil utilisées pour définir la résistance et la sensibilité à la pénicilline G étaient les suivantes: sensible, & lt; pg / ml; et résistant, & gt; μg / mL Les valeurs de l’amoxicilline et du céfotaxime étaient les suivantes: sensible, & lt; pg / ml; et résistant, & gt; μg / mL La production de β-lactamase a été évaluée avec des disques de Cefinase bioMérieuxPCR-polymorphisme de longueur de fragment de restriction du gènepenAgene La région codante entière du gène penA a été amplifiée par PCR, digérée par des enzymes et analysée par électrophorèse, comme décrit ailleurs. ont été comparés par le progiciel Taxotron PAD Grimont, comme décrit ailleurs Analyse statistique L’analyse statistique des données a été effectuée par le χtest avec la correction Mantel-Haenszel P & lt; a été considéré comme statistiquement significatif

Résultats

Caractéristiques générales des isolats invasifs de méningocoques L’incidence annuelle des cas confirmés par culture en France au cours de la période de – était & lt; Cette faible incidence semble être restée stable puisque les souches du sérogroupe B étaient les plus fréquentes%, suivies des souches du sérogroupe C% et du sérogroupe W% Cependant, le nombre de cas dus aux souches des sérogroupes C et W a augmenté depuis L’augmentation du nombre de cas dus aux souches du sérogroupe W semble être un développement récent corrélé avec l’expansion clonale des souches méningococciques du sérogroupe W appartenant au complexe clonal ET- Le sérogroupe A est rare en France, seules les souches isolées –

Figure Vue largeTélécharger des groupes d’isolats méningococciques invasifs en France pendant – Nongroupable NG comprend des souches autoagglutinables et polyagglutinablesFigure Voir grandTélécharger des groupes d’isolats invasifs de méningocoques en France pendant – Nongroupable NG comprend des souches autoagglutinables et polyagglutinablesDurant la période de -, les isolats méningococciques invasifs étaient principalement non typables NT; % et de sérotype% dans le sérogroupe B; des sérotypes a% et b% dans le sérogroupe C; et NT% et du sérotype a% dans le tableau du sérogroupe W Tous les isolats du sérogroupe A étaient du sérotype, étaient du sérosubtype P-, étaient du sérosubtype P-, et étaient du sérosubtype P-, données non montrées Pendant -, nous avons observé une augmentation de la proportion de sérogroupe: sérotype B: et C: a mais une diminution de la proportion d’isolats caractérisée comme B: NT

Tableau View largeTélécharger la distribution des isolats invasifs de méningocoques, par sérogroupe, en France pendant la période de distribution -Table View largeTéléchargementSerotype distribution des isolats invasifs de méningocoques, par sérogroupe, en France pendant la période de résistance aux antibiotiques méningococciques invasifsLes souches ont été classées en catégories sensibles, intermédiaires ou résistantes selon les diamètres des zones d’inhibition obtenues Tableau Deux tiers des isolats étaient résistants aux sulfamides,% résistants à l’oxacilline et% résistants à la spectinomycine Six souches du sérogroupe A étaient résistantes à la tétracycline: A :: P- et A = P-, ​​Quatre souches du sérogroupe B étaient résistantes à la spiramycine Un isolat était résistant à la fois à l’érythromycine et à la spiramycine et présentait également une sensibilité réduite à la pénicilline G MIC de la pénicilline, μg / mL Seul l’isolat sérogroupe W présentait une résistance intermédiaire à la rifampicine , et un autre isolat sérogroupe C était résistant à cet antibiotique Aucune résistance au chloramphénicol n’a été observée, mais les isolats avaient une résistance intermédiaire au chloramphénicol rubéole. Douze de ces isolats appartenaient au sérogroupe B et étaient B: Un tiers des isolats méningococciques présentait une sensibilité réduite à la pénicilline G, le% présentait une sensibilité réduite à l’ampicilline, sensibilité réduite à l’amoxicilline,% ont montré une sensibilité réduite à l’amoxicilline plus acide clavulanique,% ont montré une sensibilité réduite à la spectinomycine,% ont montré une sensibilité réduite à la spiramycine,% ont montré une sensibilité réduite à l’érythromycine et% ont montré une sensibilité réduite aux sulfamides. résistance au niveau des céphalosporines céfotaxime ou ceftriaxone, fluoroquinolones pefloxacine, chloramphénicol, amoxicilline ou pénicilline G Aucune souche productrice de β-lactamase n’a été détectée

Tableau View largeTélécharger la diapositivePrévalence des isolats antiméningococciques invasifs résistants aux antimicrobiens en France durant la période de consultationTaille largeTéléchargerLa prévalence des isolats antiméningococciques invasifs résistants aux antimicrobiens en France pendant les CIM de pénicilline G, d’amoxicilline et de céfotaxime a également été déterminée par Etest, qui a fourni des résultats similaires à ceux pour le test de diffusion sur disque-agar:% d’isolats méningococciques ont montré une sensibilité réduite à la pénicilline G,% ont une résistance intermédiaire à l’amoxicilline, et les souches ont une résistance intermédiaire à la céfotaxime / mL pour la pénicilline G, – μg / mL pour l’amoxicilline et – μg / mL pour la céfotaxime figure A Les valeurs moyennes géométriques de la CMI étaient de μg / mL pour la pénicilline G, μg / mL pour l’amoxicilline et μg / mL pour le céfotaxime. n’était pas absolu entre les résultats de Etest et ceux du test de diffusion sur disque-agar, en particulier pour les souches avec des CMI proches de t La table des valeurs critiques

Figure Vue largeDownload, CMI de la pénicilline G, amoxicilline et céfotaxime CMI pour tous les isolats méningococciques invasifs AB et C, CMI de l’amoxicilline B et céfotaxime C pour les isolats méningococciques invasifs, selon leur sensibilité à la pénicilline G en France pendant – PenI, pénicilline intermédiaire; Les CMI de la pénicilline G, de l’amoxicilline et du céfotaxime pour tous les isolats méningococciques invasifs AB et C, les CMI de l’amoxicilline B et du céfotaxime C pour les isolats méningococciques invasifs, en fonction de leur sensibilité à la pénicilline G en France durant – PenI, pénicilline intermédiaire; PenS, sensible à la pénicilline

Vue de la table grandDownload slideCorrelation entre les diamètres d’inhibition et la CMI de la pénicilline GTable View largeDownload slideCorrélation entre les diamètres d’inhibition et la CMI de la pénicilline GTes données indiquent que les souches méningococciques isolées en France étaient globalement sensibles à tous les antibiotiques actuellement utilisés dans le traitement ou chimioprophylaxie de infections à méningocoques La prévalence élevée des isolats méningococciques à sensibilité réduite à la pénicilline est plus importante. Isolants à sensibilité réduite à la pénicilline. Susceptibilité réduite à la pénicilline G, par sérogroupes et sérotypes Pendant la période, le sérogroupe B était le plus fréquent parmi les isolats PénI. %, suivi du sérogroupe C%, du sérogroupe W% et du sérogroupe Y% La prévalence des isolats PenI dans les souches du sérogroupe C et du sérogroupe W% était significativement plus élevée P & lt; et P & lt; , respectivement, que dans les souches d’autres sérogroupes, les isolats Penu appartenaient à une variété variée de sérotypes, et la distribution des isolats Péni invasifs méningococciques, par sérotype, est montrée dans la figure Le sérotype du sérogroupe B était plus fréquemment associé au phénotype P1% de B : les isolats ont été PIDI que les autres sérotypes du sérogroupe BP & lt; Des souches de sérotype b dans les souches de sérogroupe C% et NT dans le sérogroupe W% étaient également fréquemment associées au phénotype PenI P & lt; et P & lt; , respectivement La prévalence des isolats PIRI était particulièrement élevée chez les souches sérogroupe: sérotype B: et W: NT dans et parmi les souches C: b

Figure View largeDownload slidePrévalence des isolats péniens invasifs de pénicilline méningococcique-pénicilline, par sérogroupe, en France au cours de -Figure View largeDownload slidePrévalence des isolats Péni-pénicillin-méningococciques invasifs intermédiaires, par sérogroupe, en France pendant –

Figure View largeDownload slidePrévalence des isolats PenI intermédiaires de la pénicilline méningococcique-invasive, par sérogroupe: sérotype, en France durant la période de la maladie -Variation de la variabilité des isolats Péni-pénicilline-invasifs méningococciques intermédiaires, par sérogroupe: sérotype, en France pendant la réduction de la pénicilline Les CMI de la pénicilline G et de l’amoxicilline étaient fortement corrélés Figure A En outre, les souches présentant une sensibilité réduite à l’amoxicilline CMI, – μg ont été fortement corrélées avec les autres antibiotiques β-lactamines. Cependant, toutes les souches de méningocoques du groupe PenI présentant des CMI de pénicilline proches de la valeur seuil μg / mL ne présentaient pas une sensibilité aux données d’amoxicilline non démontrée. Les CMI de l’amoxicilline étaient – μg / mL et – μg / mL pour les isolats PenS et PenI sensibles à la pénicilline, respectivement figure B Les CMI de cefot axime étaient – μg / mL et – μg / mL pour les isolats PenS et PenI, respectivement Figure C La CMI moyenne géométrique de l’amoxicilline était et μg / mL pour les isolats PenS et PenI, respectivement, et la moyenne géométrique MIC du céfotaxime était et μg / L ‘augmentation des CMI de l’ amoxicilline était supérieure à l ‘augmentation des CMI du céfotaxime parmi les isolats de PénI Analyse moléculaire du gène penA Le polymorphisme du gène penA des souches PenS et des souches PenI isolées en France pendant la période – était Les souches PenS ont montré des allèles penA hautement liés, séparés par une distance génétique de ⩽ L’allèle penA le plus fréquent parmi les souches PenS était penA Cependant, les souches PenI ont donné des allèles penA modifiés différents de ceux des PenS. souches, séparées par une distance génétique de & gt;

Figure Dendrogramme à grande échelle par dendrogramme obtenu par la méthode des moyennes non pondérées des groupes de paires montrant les distances génétiques entre les gènes penA des souches PenS sensibles à la pénicilline et les souches PenI intermédiaires pénicillines isolées en France pendant – Pour chaque allèle penA, le nombre des souches testées et le nombre de formules antigéniques différentes sont indiquées à droiteFigure Dendrogramme à grande échelle obtenu par la méthode non pondérée des paires par groupes de moyennes montrant les distances génétiques entre les gènes PénA des souches PenS sensibles à la pénicilline et Péni-pénicilline intermédiaire souches isolées en France pendant – Pour chaque allèle penA, le nombre de souches testées et le nombre de formules antigéniques différentes sont indiqués à droite

Discussion

clone réticulaire dans le complexe ET-, mais d’autres clones diffusent maintenant des données non montréesUn traitement antibiotique rapide est crucial et peut déterminer le résultat d’une infection méningococcique Une surveillance continue est nécessaire pour surveiller les tendances de la sensibilité aux médicaments antimicrobiens dans N meningitidis. cliniciens sur la thérapie empirique appropriée et la chimioprophylaxie Nos données montrent que N meningitidis est sensible aux antibiotiques actuellement utilisés pour traiter les infections méningococciques et pour la chimioprophylaxie parmi leurs contacts étroits aucune résistance élevée n’a été observée pour la pénicilline G, céfotaxime, ceftriaxone, chloramphénicol Les mutations du gène rpoB, qui code la sous-unité β de l’ARN polymérase, sont responsables de la résistance à la rifampicine , mais des mécanismes supplémentaires, tels que des altérations de la perméabilité membranaire , peut être impliqué Pas d’expansion dans le nu De nombreuses souches résistantes au chloramphénicol ont été observées depuis que de telles souches ont été décrites pour la première fois en France et au Vietnam. De plus, la propagation de ces souches n’a été signalée nulle part ailleurs, particulièrement en Afrique Les quinolones sont également recommandées pour la chimioprophylaxie. Des infections à méningocoques et seulement un isolat invasif méningococcique montrant une diminution de la sensibilité aux quinolones due à une mutation du gène gyrA ont été signalés en Australie La prévalence des méningocoques à sensibilité réduite à la pénicilline était de ~% en France. ,% et% au cours de ces années Depuis que les souches PenI méningococciques ont été isolées pour la première fois en Espagne, elles ont été signalées dans plusieurs pays, avec des prévalences variables La sensibilité réduite à la pénicilline G résulte au moins en partie gène penA codant pour la protéine liant la pénicilline, entraînant une diminution de l’affinité pour la pénicilline [,,] La prévalence des isolats PenI dans le sérogroupe C et le sérogroupe W était significativement plus élevée que dans les autres sérogroupes Figure A Une prévalence plus élevée des isolats PenI dans le sérogroupe C a été signalée en Espagne Cependant, la prévalence des isolats PénI était plus élevée dans les souches du sérogroupe B En Écosse, la prévalence des isolats PIRI était plus élevée dans les isolats du sérogroupe W pendant – De plus, les isolats PénI du méningocoque étaient significativement plus susceptibles d’être associés à un sérogroupe spécifique: combinaisons de sérotypes Les souches de sérotypes des sérogroupes B, b du sérogroupe C et NT du sérogroupe W étaient plus fréquemment du phénotype PenI. Une association a également été trouvée entre sensibilité réduite à la pénicilline et sérogroupe: sérotype C: b en Espagne et en Angleterre et au Pays de Galles La nature hétérogène des souches PenI a également été reflétée par l’analyse du polymorphisme du gène penA. En effet, les allèles penA modifiés étaient diverses, suggérant que des souches PenI sont apparues à de nombreuses occasions et qu’aucune expansion clonale n’a été observée pour les souches PenI car les souches ayant le même allèle penA modifié présentaient diverses formules antigéniques. L’augmentation des souches spécifiques, telles que C: b, peut expliquer l’élévation globale du pourcentage de souches PenI en Espagne Cependant, l’élévation des souches PenI en France était probablement le résultat de l’augmentation d’autres types de souches, telles que B: et W: NT Figure isolats de Méningococcus PenI ont montré divers niveaux de résistance croisée aux autres antibiotiques β-lactamines Figure B et C L’augmentation de la CMI de l’amoxicilline était supérieure à l’augmentation de la CMI du céfotaxime parmi les isolats PénI. La sensibilité réduite à l’amoxicilline était fortement corrélée au phénotype PénI. dans l’identification du phénotype PenI, en particulier lorsqu’une controverse est observée entre les résultats de Etest et le test de diffusion disque-agar. Le polymorphisme du gène enA peut être utilisé comme un outil complémentaire pour identifier le phénotype PenI dans les souches avec des CMI proches de la valeur seuil En effet, nous avons précédemment rapporté des souches méningococciques mal classées comme PenI mais hébergeant l’allèle sensible à l’allèle penA, et En outre, la prévalence des isolats de méningocoques présentant une résistance intermédiaire et une résistance aux sulfamides, à la spectinomycine, à l’érythromycine et à la spiramycine était significativement plus élevée parmi les isolats de PII que parmi les isolats de PenS P & lt; , P & lt; , P & lt; et P & lt; , respectivement; données non montrées La sensibilité des souches méningococciques invasives testées aux céphalosporines à large spectre céfotaxime et ceftriaxone soutient l’utilisation de ces médicaments pour traiter les infections causées par des souches présentant une sensibilité réduite à la pénicilline G L’émergence de souches pour lesquelles la CMI de la pénicilline G est & gt; μg / mL pourrait poser de sérieux problèmes pour le traitement des infections à méningocoques